选择固定液的时候一定要根据不同的脏器选择更加适合的固定液,另外,固定液的容器、取材操作以及固定液的体积也是很重要的。
取材手法:要求取材器械锋利,避免挤压挫伤样本
取材速度:尽量保证样本离体5min内放入合适的固定液中
组织块大小:厚度不要超过1CM
固定液量:固定液体积为组织的10倍,且组织能在容器内自由移动,并做好清晰标记。
固定温度:常温即可,无需冷藏,切勿冷冻结冰。
问题:组织取的过厚,靠近中间的组织固定不好。
可能导致的后果:染色不均匀,伊红不着色或着色浅,组织易裂片掉片
解决方案:提前告知客户风险,如果客户能承担风险需签字后进行实验。实验室尽可能取靠近边缘固定相对较好的组织进行实验。
问题:固定液浑浊有大量絮状物,可能固定液浓度太低或者液体根本不是固定液或者固定时间不够就转移至PBS,纯水中等。组织固定不彻底或者完全没有固定。
可能导致的后果:组织自溶细胞结构破坏,染色不均匀,伊红不着色或着色浅,组织易裂片掉片
解决方案:收样时可以具体询问客户固定液信息及固定条件并提前告知客户风险,如果客户能承担风险需签字后进行实验。
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